Kompleks TNF-alfa in treh topnih TNF receptorjev p55; Na izpostavljeno površino enega od receptorjev je vezano monoklonsko protitelo (grafični konstrukt na osnovi znanih 3D struktur pridobljenih iz baze PDB).

Na biotehnologiji sloni velik del Lekove proizvodnje, zato v enoti Razvoj in raziskave razvijamo nove pristope na tem področju. V zadnjih desetih letih se poglobljeno ukvarjamo z metodami genskega in proteinskega inženiringa. Poleg generičnih rekombinantnih učinkovin razvijamo tudi izvirne molekule za zdravljenje in diagnostiko.

Nove molekule za zdravljenje in diagnostiko

Pri izvajanju vseh navedenih projektov sodelujemo z Univerzo v Ljubljani, predvsem s Fakulteto za farmacijo in Fakulteto za kemijo in kemijsko tehnologijo, kar nam omogoča vključitev študentov na diplomskem ali podiplomskem študiju.

Rekombinantni proteini

TNF je človeška beljakovina, ki je kot zdravilo v Evropski skupnosti odobrena od leta 1999. Uporablja se za zdravljenje neoperabilnega sarkoma s tehniko izolirane perfuzije obolele okončine. Pomembno razširitev v zdravljenju raka bi omogočili analogi TNF z bistveno manjšo sistemsko toksičnostjo, kar bi dovoljevalo uporabo večjih odmerkov in zato boljše protitumorske učinke, predvsem v kombinaciji z različnimi kemoterapevtiki.

V sodelovanju z Laboratorijem za biosintezo in biotransformacije na Kemijskem inštitutu v Ljubljani ter Oddelkom za tumorsko biologijo na Onkološkem inštitutu v Ljubljani smo doslej na osnovi analize znane 3D-strukture TNF oblikovali in pripravili več analogov, ki imajo na miših z modelnimi tumorji Sa-1 do 5-krat manjšo sistemsko toksičnost. Zaradi bistveno manjše sistemske toksičnosti in zvečanega terapevtskega indeksa so navedeni analogi izboljšana oblika naravnega TNF in dobro izhodišče za morebitna nova zdravila pri zdravljenju sarkoma in melanoma.

S. Novaković, V. Menart, V. Gaberc-Porekar, A. Štalc, G. Serša, M. Čemažar, B. Jezeršek:
New TNF-α analogues: A powerfull but less toxic biological tool against tumours, Cytokine, 9, 59-604, 1997.

V. Menart, B. Kus, S. Novaković, G. Serša, V. Gaberc-Porekar, V. Harb, S. Miličić, A. Štalc:
Searching for new TNF-α analogs having potential application in cancer therapy, Pfluegers Arch - Eur J Physiol 431 (Suppl 2): R233-R234, 1996.

Monoklonska protitelesa

Raven topnih receptorjev TNF v krvi se bistveno zveča pri nekaterih boleznih. Zato je določanje njihove koncentracije lahko morebiti uporabno pri diagnostiki ali napovedi izida bolezni. Na osnovi kompleksov našega analoga TNF LK-802 in topnih receptorjev so na Zavodu za transfuzijo Republike Slovenije pripravili vrsto mišjih hibridoma celic, ki proizvajajo specifična monoklonska protitelesa. Čeprav se v krvi nahaja kompleksna mešanica prostega TNF in raznih kompleksov z obema znanima topnima receptorjema TNF, lahko na osnovi specifičnih protiteles zanesljivo določimo koncentracije posameznih sestavin. To pa je trdna osnova za razvoj testov ELISA, ki bi bili uporabni pri diagnostiki ali za spremljanje učinkov zdravljenja pri nekaterih rakastih boleznih.

V.Čurin-Šerbec, A. Schuurbiers, V. Menart, V. Gaberc-Porekar, A. Štalc, P. Žunec, J. Ocvirk, B. Štabuc:
Monoclonal antibodies against soluble TNF-α receptors p55 and p75 as well as against TNF-α and its analogues, AU Pat. 703091, 1999.

V. Galvani, K. Pretnar Hartman, R.R. Rupreht, S. Novaković, B. Štabuc, J. Ocvirk, V. Menart, V. Gaberc-Porekar, A. Štalc, P. Rožman, V. Čurin-Šerbec:
Soluble tumor necrosis factor receptor (sTNFr) as a prognostic factor in melanoma patients in Slovene population; Pfluegers Arch - Eur J Physiol 440 (Suppl): R61-R63, 2000.